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二氧化碳培养箱水盘污染控制问题

细胞培养时,使用的二氧化碳培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法,即通常的二氧化碳培养箱内均放置一个3L的水盘,内盛3L无菌纯水,依靠水的自然蒸发,使箱体内湿度达到95%。二是一些高级的二氧化碳培养箱,采用主动加湿系统(蒸汽发生器,加热水盘,喷雾器等),可以控制箱体内的湿度。

然而在这种高湿度条件下,放置在箱体内部的水盘中的纯净水,很容易造成微生物的滋生,产生污染,导致细胞培养完全失败。

目前,控制水盘内污染的方法有如下几种:

1、定期(至少每两周一次),更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。

2、在水盘内添加适量硫酸铜,配制方法:20g无水硫酸铜+5ml浓硫酸+1L灭菌纯水。

3、夏季气温高时,水盘里加0.02%的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。

4、水盘内添加适量抗生素。

5、定期为培养箱(含水盘)进行一次高温灭菌。

6、使用专用的水盘污染控制试剂,如市面上有些二氧化碳培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒,说明书上描述能有效杀灭600中微生物,能持续使用6个月,但此类专用污染控制试剂较常规方法,存在价格较昂贵缺点。

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